虫草复方制剂对动脉粥样硬化的作用机制

研究红细胞免疫粘附功能与动脉粥样硬化的关系,观察虫草复方制剂治疗动脉粥样硬化的作用及机理。

资料来源:《山东大学学报》(医学版)。作者:马骁、李莉、关一军、张伟(山东大学齐鲁医院心内科,山东济南250012)。目的:研究红细胞免疫粘附功能与动脉粥样硬化的关系,观察冬虫夏草复方制剂对动脉粥样硬化的作用及其机制 方法:20只雄性家兔分别饲喂高脂饲料12周和添加虫草复方制剂的高脂饲料8周。测定高脂饮食前后和药物治疗后红细胞c3b受体花环形成率(rbc c3brr)、红细胞免疫复合物花环形成率(rbc icr)、循环免疫复合物(cic)和血脂水平。采用超声技术测量高脂饮食前后和药物治疗后家兔腹主动脉的最大内膜中层厚度。

结果:与实验前相比,饲喂高脂饲料后血脂水平明显升高。Imtm增厚[(0.32±0.02)毫米vs(0.89±0.19)毫米,p 0.01];红细胞c3brr降低[(10.36±2.14)%,而红细胞c3brr降低(6.44±1.95)%,p 0.011;红细胞-icr增加[(13.25±2.97)%,vs(20.27±3.02)%,p 0.01];中投公司增加了[156.60±40.27,而不是537.55±141.95,p 0.01];血脂水平和cic与imtm呈正相关。 与饲喂高脂饲料相比,[(0.89±0.19)mm与(0.52±0.18)mm药物治疗后血脂水平和imtm均有所下降,p 0.001);红细胞c3brr增加[(6.44±1.95)%,而红细胞c3brr增加(9.77±1.25)%,P 0.011);红细胞-icr降低[(20.27±3.02)%,vs(15.21±1.92)%,p 0.001];中投公司减少[537.55 141.95对233.45 36.05,p 0.001] 结论:红细胞免疫功能下降是动脉粥样硬化的重要危险因素之一,虫草复方制剂可能是一种有前途的抗动脉粥样硬化药物,值得进一步研究。

关键词:动脉硬化;玫瑰花结形成;虫草。动脉粥样硬化是多种因素协同作用引起的病理过程。病因仍不清楚。近年来,免疫机制在动脉粥样硬化中的作用受到重视。 本研究检测了中药复方制剂治疗高脂饮食前后家兔红细胞免疫粘附功能、脂质水平和腹主动脉最大内膜中层厚度,以探讨中药复方制剂对动脉粥样硬化的作用及其机制。

虫草复方制剂对动脉粥样硬化的作用机制

1、材料和方法

1.1、山东实验动物中心提供20只4~5月龄雄性家兔,重2.0~2.5公斤,用于实验动物实验。

1.2、材料和仪器基础颗粒饲料由山东实验动物中心提供,高脂饲料由普通颗粒饲料混合1%胆固醇、6%猪油和1%盐制成。冬虫夏草复方制剂是将冬虫夏草、黄芪、丹参按一定比例研磨成粉末,在100克饲料中加入5克中药制成成型品;聚乙二醇(peg),相对分子质量(mr)6000,购自广州医疗站化学试剂科;酵母试剂由上海第二军医大学长海医院免疫室提供。致敏酵母用1: 12小鼠血清致敏。血脂由日产日立7170a自动生化分析仪测定。采用美国惠普公司的hp-5500多普勒超声诊断仪检测腹主动脉,外周血管探头频率为7.5兆赫。

1.3、在实验过程中,动物被饲养在一个没有饮用水限制的笼子里。每只动物每天吃150克饲料。 调整基础饲料2周,稳定血脂和代谢水平,采集空腹股静脉血样,测定总胆固醇(tc)、甘甘油三酯(tg)、高密度脂蛋白胆固醇(高密度脂蛋白胆固醇,Hdl-c)、低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)、红细胞c3b受体花环率(RBC-C3BrR)、红细胞免疫复合物花环率(rbc-icr)和循环免疫复合物含量 再喂高脂饲料12周,重复测定上述指标。 饲喂含虫草复方制剂的高脂饲料8周,并重复测定上述指标。

1.4、血液样本测定所有血液样本均在早上空腹时从股静脉血中采集,并在4小时内完成。 Ch、tg、hdl-c和ldd-c均采用酶法测定。 红细胞c3brr用于表达红细胞c3b受体的活性,红细胞icr用于表达红细胞粘附免疫复合物的含量,红细胞c3brr和红细胞icr分别采用红细胞c3b受体花环法和郭峰等人介绍的红细胞免疫复合物花环法检测。 采用周黄金等人介绍的聚乙二醇沉淀法检测Cic。

1.5、四肢固定在检查台上仰卧腹主动脉实验兔imtm的测量 对于腹部皮肤准备,用血管探头沿腹部中线左侧从上到下测量腹主动脉,并分别在短轴和长轴视图中测量腹主动脉的最大内膜中层厚度(imtm)。

1.6、统计处理的实验数据均用平均标准差表示,两者的比较用t检验,变量间的相关性用线性相关分析

2、结果

2.1、血脂含量测定结果与饲喂高脂饲料12周后的基础状态相比,胸水、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇显著升高,高密度脂蛋白胆固醇变化无统计学意义。饲喂虫草复合制剂饲料8周后,ch、tg和ldl-c较饲喂高脂饲料后有所下降,但仍高于基础状态,hdl-c有所上升。
2.2、与基础状态相比,高脂饮食后红细胞c3brr下降。红细胞icr和cic显著增加。饲喂冬虫夏草配合饲料后,红细胞c3brr增加,红细胞icr和cic下降。
2.3、高脂饮食后腹主动脉内膜中层厚度的测量结果,腹主动脉内膜中层厚度与基础状态[(0.32±0.02)mm和(0.89±0.19)mm相比明显增厚,差异有统计学意义(0.001);饲喂冬虫夏草复合制剂饲料后,Imtm降低了[(0.89±0.19)mm对(0.52±0.18)mm,p 0.001],但仍比基本状态[(0.52±0.18)mm对(0.32±0.02)mm,p 0.01)厚 高脂饮食后腹主动脉内膜中层厚度与胸主动脉内膜中层厚度呈正相关(r=0.78,P 0.001);与hdl-c负相关(r-0.60,p 0.01);与低密度脂蛋白胆固醇正相关(r=0.79,p 0.001) Cic含量与imtm呈正相关(r=0.63,p 0.01)

3、讨论

Imt增厚是动脉粥样硬化的典型病理特征。兔腹主动脉内膜、中膜和外膜的二维超声显示基本状态下典型的双线征。超声技术测量动脉imt的准确性已得到证实。 本研究结果表明,高脂饮食后家兔腹主动脉内膜厚度显著增厚,脂水平与内膜厚度高度相关。高脂血症与动脉粥样硬化之间的关系在体内动物模型上得到证实。 喂食含有虫草复方制剂的饲料后,腹主动脉的Imt没有变薄,表明该制剂对动脉粥样硬化病变有消退作用,同时,动脉imt的超声检测被证明是观察动脉粥样硬化形成和消退的可靠的无创方法。

动脉粥样硬化是多种因素协同作用引起的病理过程。近年来,动脉粥样硬化的免疫机制受到重视。 cic在血管壁上沉积引起的免疫病理损伤被认为是动脉粥样硬化的重要危险因素之一。体内cic主要被红细胞清除,红细胞的免疫粘附功能下降。cic可以在体内大量积累并沉积在血管壁上。CIC与血管内皮细胞受体结合后,在蛋白水解酶和巨噬细胞的共同作用下,会对内皮细胞造成免疫损伤。 此外,红细胞免疫粘附功能低下还会降低机体对细菌和病毒等抗原的清除。许多研究表明动脉粥样硬化的发生和发展与肺炎衣原体、巨细胞病毒和其他感染密切相关。同时,细菌和病毒感染也是血管内皮细胞损伤的重要危险因素。 本研究结果表明,饲喂高脂饲料后,家兔红细胞免疫功能异常,红细胞c3brr显著下降,红细胞icr和cic含量显著增加,表明饲喂高脂饲料后,家兔红细胞膜c3b受体活性或数量下降,c3b受体携带的免疫复合物含量增加。 随着血脂的增加和免疫功能的异常,腹主动脉imt明显增厚。相关性分析表明,cic与腹主动脉imt呈正相关。 以上结果提示红细胞免疫功能障碍和体内cic大量积累是动脉粥样硬化的重要危险因素之一。

本研究结果表明,冬虫夏草复方制剂应用于高脂血症家兔后,腹主动脉imt值明显降低,表明冬虫夏草复方制剂具有抗动脉粥样硬化的作用 许多研究证实冬虫夏草复方制剂的各组分具有调节机体细胞和体液免疫、增强单核巨噬细胞系统活性、改善红细胞免疫功能等功能。 本研究结果表明,虫草复方制剂应用后,血脂水平下降,红细胞c3brr增加,红细胞icr和cic下降。 因此,我们认为虫草复方制剂可以通过降低血脂水平、改善红细胞免疫粘附功能、促进cic传递和治疗等机制消除实验性早期动脉粥样硬化。

综上所述,红细胞免疫功能降低是动脉粥样硬化的重要危险因素之一,虫草复方制剂可能是一种有前途的抗动脉粥样硬化药物,值得进一步研究。

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